Elemente de investigare si identificare biocriminalistica pe baza profilului A.D.N.

Elemente de investigare si identificare biocriminalistica pe baza profilului A.D.N

1. Particularitati ale cercetarii la fata locului

De regula, in linii mari, cercetarea urmelor apte sa serveasca la identificari genetice parcurge aceleasi etape tehnice, tipice urmelor biologice (sange, sperma, saliva), de la descoperire, la fixare fotografica si ridicare. Fireste ca se impun precautii suplimentare. Obiectele sau suporturile purtatoare de urme biologice care se ridica in vederea analizarii A.D.N. vor fi verificate pentru a fi puse in evidenta alte urme importante, cum ar fi urmele papilare. Pentru fiecare proba se va folosi un tip special de recipient care sa ofere o conservare optima si un transport sigur. Sangele lichid, tesuturile, organele sau oasele se containerizeaza si se refrigereaza in vederea transportarii in conditii optime. Spre deosebire de sangele colectat lichid, petele de sange aflate pe obiecte vor fi uscate inainte de a fi impachetate si trimise laboratorului. Parul trebuie colectat cu grija pentru a evita ruperea tijei sau atingerea radacinii, furnizoare de informatie genetica.

Raportat la sensibilitatea tehnicilor A.D.N., contaminarea probelor este o adevarata problema . Pentru a evita acest pericol se folosesc manusi si pensete adecvate, avantajul folosirii acestora fiind posibilitatea schimbarii lor ori de cate ori devin contaminate. Instrumentarul folosit, atat in cercetarea la fata locului, cat si in analizele de laborator, se curata cu tampoane cu alcool dupa ridicarea fiecarui obiect. De asemenea, se recomanda purtarea unor masti pentru a evita stropii de saliva in caz de stranut, tusit sau chiar vorbit in apropierea suprafetelor purtatoare de urme. Bineinteles ca este obligatorie purtarea de manusi.

2.Efectuarea expertizelor A.D.N.

In 1985, Alec Jeffreys preciza faptul ca minisatelitii existenti in genomul uman prezinta o zona centrala ce se repeta de mai multe ori in cadrul unui fragment unic, determinand astfel polimorfismul lungimii fragmentului de restrictie. Astfel, meto­da identificarii prin cercetarea amprentei genetice a fost adoptata tocmai datorita polimorfismului extrem de mare al minisatelitilor A.D.N-ului uman, ceea ce determina un potential de discriminare (diferentiere) foarte ridicat.

Analiza profilului A.D.N., in laboratoare specializate, se desfasoara prin doua metode: metoda analizei amprentei genetice prin enzime de restrictie si metoda reactiei in lant a polimerazei (PCR)².

2.1. Analiza prin metoda enzimei de restrictie. In cazul utilizarii metodei prin enzime de restrictie, este necesara o cantitate suficienta de A.D.N. ce este supusa izolarii si purificarii cu ajutorul unor detergenti si enzime cu mare specificitate, cum ar fi proteinaza K . Cea de-a doua etapa o constituie decuparea A.D.N.-ului cu ajutorul unor enzime de restrictie, in fragmente de marimi diferite.

Rezultatul analizei il constituie vizualizarea fragmentelor A.D.N. sub forma unor benzi intunecate. Benzile astfel obtinute pot fi folosite pentru comparatie cu cele rezultate din prelucrarea probelor ridicate de la fata locului. Lipsa corespondentei benzilor compa­rate duce la eliminarea din cercul suspectilor a persoanei examinate.

2.2. Analiza prin metoda reactiei in lant a polimerazei (PCR). O alta metoda care s-a impus extrem de rapid este aceea a reactiei in lant a polimerazei (PCR = polymerase chain reaction)¹. Avantajul acestei metode fata de metoda cu enzime de restrictie consta in sensibilitatea acesteia, putandu-se folosi o singura molecula de A.D.N. pentru a fi amplificata².

Metoda consta in amplificarea in vitro a secventelor A.D.N. prin cicluri de denaturare A.D.N, fixarea primerilor si extinderea cu polimeraza A.D.N. Metoda PCR este rapida, sim­pla, necesita fragmente de dimensiuni mici pentru studiere si permite reanalizari multiple.

Privitor la valoarea de identificare pe baza profilului A.D.N., in ciuda contro­verselor si criticilor ce nu au intarziat sa apara, precizam ca amprenta genetica ofera dovada stiintifica a unicitatii noastre. Astfel, s-a impus in investigatiile criminalistice o noua metoda de identificare, cu sanse reale in realizarea actului de justitie penala sau civila, in conditii de certitudine si de obiectivitate.