Analiza bacteriologica a apei potabile. dezinfectia apei potabile

ANALIZA BACTERIOLOGICA A APEI POTABILE. DEZINFECTIA APEI POTABILE

Scopul analizari microbiologice a apei este de a aprecia gradul de incarcare microbiana a unei ape precum si felul germenilor pentru stabilirea potentialului de risc pentru sanatate

• Din punct5 de vedere sanitar flora microbiana din apa se clasifica in doua categorii:
• Microflora proprie apei (naturala)
• Microflora de impurificare

a. Microflora proprie naturala

• se gaseste in orice fel de apa
• este formata din :
• bacterii fluorescente
• bacterii nitrificatoare
• sulfobacterii
• feribacterii
• coci etc.
• aceasta flora ia parte in procesele de degradare biochimica a substantelor organice

b. Microflora de impurificare

provine din:

• apele reziduale deversate
• dejecte umane si animale
• odata cu substantele organice aduse de acestea
• eset formata din specii microbiene provenite de la om si animale (saprofite, conditionat patogene, strict patogene)
• bolile transmise prin apa evolueaza ca epidemii hidrice
• etiologic: bacterioze, viroze, parazitoze
• majoritatea epidemiilor hidrice sun provocate de agenti patogeni cu poarta de intrare intestinala:
• Vibrio cholerae
• Schigella disentariae
• Salmonella typhy
• Escherichia coli

• Controlul urmareste decelarea germenilor care ajung in apa prin dejecte!
• Analiza curenta
• STAS 3001/91

Pentru cercetarea bacteriologica a apei se folosesc:

• Numarul total de germeni
• Coliformii (totali si E. Coli)
• Enterococii (Streptococus faecalis)
• Germenii sulfito-reducatori (Clostridium perfringens)

• Ultimii 3 fiind germeni indicatori de contaminare a apei cu continut intestinal
• Acesti germeni indicatori (2,3,4) sunt de fapt saprofiti intestinali si sunt eliminati prin dejecte
• „indicatorii poluarii fecale a apei”,
• coliformii indica cel mai bine contaminarea apei cu continut intestinal pentru ca se gasesc in cantitatea cea mai mare in intestin

• asociind cercetarea celor 3 indicatori bacteriologici se poate exprima vechimea impurificarii apei:
• coliformi si enterococi = impurificare recenta
• coliformi si sulfito-reducatori (rezistenti) = ipurificare veche

1. Determinarea numarului total de germeni la 37oC/cm3 apa

• cu cat numarul lor este mai mare cu atat contaminarea apei este mai mare deci si posibilitatea prezentei germenilor patogeni creste
• principiu
• di fiecare germen se dezvolta cate o colonie vizibila pe mediile de cultura
• numarand coloniile se determina numarul total de germeni din volumul de apa cercetat
• Mod de lucru
• Se flambeaza gura flacolului de apa de cercetat
• Se fac dilutii zecimale, in functie de gradul de contaminare presupus
• (ex. dilutia 1/10=1cm3 apa de analizat + 9 cm3 apa sterila)
• cu pipete sterile se introduce cate 1 cm3 apa de analizat in cate doua cutii Petri sterile cu cate 10 cm3 geloza nutritiva topita si racita
• dupa solidificare se introduc in termostat la 37oC cu capacul in jos
• timp de incubare: 24 ore pentru apele neclorate
• 48 ore pentru apele clorate
• se iau in considerare placile in care s-au dezvoltat peste 10 colonii si sub 300 colonii
• se numara toate coloniile de pe suprafata si din interiorul mediului cu ochiul liber sau cu lupa

Calcul

unde

• N = numarul total de germeni
• n = numaruls de colonii crescute pe fiecare placa
• N_p = numarul placilor luate in calcul
• d = grad de dilutie a materialului insamantat

Norme igienico-sanitare:

ANALIZA: Geomorfologia climatica – caracteristici generale ANALIZA: Masivul gilau-muntele mare - elemente fizico-geografice

2. Determinarea numarului de coliformi/100 cm3 apa

(Indicele coli)

• indica contaminarea apei cu continut intestinal uman sau animal deci si posibilitatea existentei unor agenti patogeni intestinali
• germenii coliformi sunt saprofiti normali in intestinul uman si animal
• bacili mobili, Gram –
• nesporulati
• prin incalzire la 37 oC fermenteaza lactoza cu producere de gaz si aciditate
• reprezinta 70-80% din flora intestinala
• sunt rezistenti in mediul exterior
• rezista la unele dezinfectante
• sunt usor de evidentiat
• se evidentiaza prin metoda colimetriei

3 teste bacteriologice:

test de prezumtie

test de confirmare

test de identificare a E. Coli

I. testul de prezumtie

• Evidentiaza prezenta germenilor coliformi prin fermentarea bulionului lactozat cu producere de gaz si aciditate pana in 48 ore, la 37 oC
• Produc flocoane in eprubete
• Se fac insamantari in tuburi cu bulion lactozat care au in interior un tun de fermentatie Durham
• Cantitatea de apa insamantata si schema de insamantare variaza in functie de felul instalatiei de aprovizionare cu apa

a. Pentru instalatii centrale care aprovizioneaza colectivitati mai mari de 70.000 locuitori:

cantitate=300 cm3 apa

schema:

in doua tuburi mari:

100 cm3 bulion lactozat

+100 cm3 apa

in 10 tuburi mici=10 cm3 buli0on lactozat

+10 cm3 apa

b. Pentru instalatii centrale care aprovizioneaza colectivitati <70.000 locuitori

cantitate=100 cm3 apa

schema: 1 tub mare=50 cm3 bulion lactozat

+10 cm3 apa

5 tuburi mici=10 cm3 bulion lactozat

+10 cm3 apa

c. Pentru instalatiile locale (fantani)

cantitate=55,5 cm3 apa

schema: in 5 tuburi mici=10 cm3 bulion

+10cm3 apa

in 5 tuburi mici=10 cm3 bulion

+ acm3 apa

in 5 tuburi mici=10 cm3 bulion

+0,1 cm3 din dilutia 1/10 apa

Schema de insamantare

d. Pentru apele de suprafata

se insamanteaza serii de cate 5 tuburi cu 10 cm3 bulion + 1 cm3 apa de analizat si di dilutii zecimale succesive in raport cu gradul estimat de impurificare a apei

dupa insamantare tuburile se incubeaza la 37 oC

germenii din genul Escherichia fermenteaza lactoza cu producere de gaz care este retinut in tubul de fermentatie

prezenta gazului de fermentatie va fi verificata la 24 si 48 ore

tuburile pozitive sunt retinute pentru testul de confirmare

tuburile fara gaz sunt negative

II. Testul de confirmare

• In scopul confirmarii daca germenii care au fermentat lactoza din bulionul lactozat sunt germeni coliformi si nu alte specii bacteriene dotate cu aceleasi proprietati (streptococul lactic, lactobacilii, unele levuri)
• Pentru acest test se folosesc medii speciale:
• Solide (EMS)
• Lichide:
• Bulion
• Bila
• Lactoza
• Verde briliant

• Consta in trecerea cu ajutorul ansei a unei picaturi di fiecare tub pozitiv la prezumtie pe un sector de placa Petri cu mediul EMS (eozina-lactoza-geloza)
• Sau intr-un tub cu mediu lichid cu bila
• Se noteaza dilutia tubului respectiv
• Se incubeaza la 37 oC
• Se urmareste dupa 24 ore aparitia coloniilor caracteristice pe mediul solid si prezenta gazului in mediul lichid
• Pe mediul EMB coliformii dezvolta colonii caracteristice:
• Rotunde
• Bombare
• Cu luciu verde, metalic
• Sau cu punct rosu central

• Mediul lichid favorizeaza cresterea germenilor coliformi cu fermentarea lactozei, alte specii fiind inhibate

III. Testul de identificare a E. Coli

• Identificarea E. Coli este un semn sigur de contaminare recenta a apei cu dejecte umane sau animale
• Consta in efectuarea testului de prezumtie apoi din tuburile pozitive (tuburile cu gaz) se insamanteaza doar in mediu lichid ( bulion, bila, lactoza, verde briliant)
• Se incubeaza la 44+-5 oC timp de 24 ore
• La aceasta temperatura mediul cu bila inhiba cresterea germenilor coliformi lasand sa se dezvolte doar E. Coli

• Stabilirea numarului probabil de germeni coliformi/cm3

• Se face pe baza unor tabele avand in vedere eprubetele configurate

Norme igienico-sanitare privind proprietatile bacteriologice ale apei potabile

DEZINFECTIA APEI

Are ca scop:

• Distrugerea germenilor patogeni din apa
• Reducerea numarului germenilor saprofiti
• Pana la normele de potabilitate

• Se aplica obligatoriu la sistemele de aprovizionare ce folosesc surse de suprafata in scopul potabilizarii
• Se aplica si in sistemul local cand situatia epidemiologica o impune
• Se realizeaza cu ajutorul substantelor clorigene
• Clorul folosit ca atare

Sau

• Sub forma de compusi clorigeni care in apa elibereaza clor activ:
• Hipoclorit de sodiu si calciu
• Oxiclorura de calciu
• Cloramina
• Clorura de var
• In ambele cazuri agentul dezinfectant este clorul
• Pentru instalatiile centrale clorul se poate folosi direct sub forma gazoasa sau indirect, intr-o solutie concentrata pregatita intr-un volum mic de apa
• Timpul minim de contact cu apa necesar este de 30 minute
• Doza nu este fixa ci trebuie introdusa o asemenea cantitate incat dupa 30 minute sa mai gasim in apa clor in exces, denumit clor rezidual

DEZINFECTIA APEI DIN FANTANI

• Se aplica oricand suspectam o impurificare (poluare)
• Constatarea impurificarii se fac prin metode chimice si bacteriologice
• Pentru ca dezinfectia sa fie eficienta trebuie sa se respecte urmatoarele conditii:

• Depistarea sursei care polueaza fantana si neutralizarea ei
• Depistarea se face prin proba cu fluoresceina (proba comunicarii)
• Reconditionarea din punct de vedere tehnico-sanitar al instalatiei (reparatii, curatirea peretilor si fundului fantanii, asigurarea protectiei sanitare a fantanii, extragerea apei din fantana
• Determinarea volumului apei don fantana (piR2h)
• Stabilirea procentajului clorului activ din substanta clorigena pe care o vom folosi
• Stabilirea cantitatii de substanta clorigena necesara pentru o solutie de 1 % stiind ca pentru 1 m3 de apa se folosesc 5-10 g clor activ

Calcul

Unde

• D = doza de clor activ in mg/dm3
• V = volumul apei din fantana in dm3
• P = procentajul de clor activ al substantei clorigene