Optimizarea protocoalelor PCR pentru amplificarea unei regiuni extinse din genomul mitocondrial in vederea realizarii tehnicii PCR-RFLP

Optimizarea protocoalelor PCR pentru amplificarea unei regiuni extinse din genomul mitocondrial in vederea realizarii tehnicii PCR-RFLP

A fost optimizat protocolul de amplificare pentru regiunea mitocondriala extinsa la speciile de salmonide analizate si au fost alese temperaturile optime pentru hibridizarea primerilor.

Figura 5.. Electroforeza in gel de agaroza 2% pentru evidentierea produsilor reactiei PCR in gradient de temperatura pentru regiunea mitocondriala extinsa la Oncorhynchus mykiss. M - Marker de masa moleculara 1 Kb; 1-7 Fragmente obtinute la urmatoarele temperaturi de hibridizare: 1 - 51sC; 2 - 51,9sC; 3 - 53,3sC; 4 - 55,2sC; 5 - 58,1sC; 6 - 60,1sC; 7 - 61,4sC.

Figura 6.. Electroforeza in gel de agaroza 2% pentru evidentierea produsilor reactiei PCR in gradient de temperatura pentru regiunea mitocondriala extinsa la Thymallus thymallus. M - Marker de masa moleculara 1 Kb; 1-7 Fragmente obtinute la urmatoarele temperaturi de hibridizare: 1 - 51sC; 2 - 51,9sC; 3 - 53,3sC; 4 - 55,2sC; 5 - 58,1sC; 6 - 60,1sC; 7 - 61,4sC.

Figura 7.. Electroforeza in gel de agaroza 2% pentru evidentierea produsilor reactiei PCR in gradient de temperatura pentru regiunea mitocondriala extinsa la Hucho hucho M - Marker de masa moleculara 1 Kb; 1-7 Fragmente obtinute la urmatoarele temperaturi de hibridizare: 1 - 51sC; 2 - 51,9sC; 3 - 53,3sC; 4 - 55,2sC; 5 - 58,1sC; 6 - 60,1sC; 7 - 61,4sC.

Figura 8.. Electroforeza in gel de agaroza 2% pentru evidentierea produsilor reactiei PCR in gradient de temperatura pentru regiunea mitocondriala extinsa la Salmo trutta labrax M - Marker de masa moleculara 1 Kb; 1-7 Fragmente obtinute la urmatoarele temperaturi de hibridizare: 1 - 51sC; 2 - 51,9sC; 3 - 53,3sC; 4 - 55,2sC; 5 - 58,1sC; 6 - 60,1sC; 7 - 61,4sC.

Figura 9.. Electroforeza in gel de agaroza 2% pentru evidentierea produsilor reactiei PCR in gradient de temperatura pentru regiunea mitocondriala extinsa la Salvelinus fontinalis M - Marker de masa moleculara 1 Kb; 1-7 Fragmente obtinute la urmatoarele temperaturi de hibridizare: 1 - 51sC; 2 - 51,9sC; 3 - 53,3sC; 4 - 55,2sC; 5 - 58,1sC; 6 - 60,1sC; 7 - 61,4sC.

Figura 10.. Electroforeza in gel de agaroza 2% pentru evidentierea produsilor reactiei PCR in gradient de temperatura pentru regiunea mitocondriala extinsa la Salmo trutta M - Marker de masa moleculara 1 Kb; 1-7 Fragmente obtinute la urmatoarele temperaturi de hibridizare: 1 - 51sC; 2 - 51,9sC; 3 - 53,3sC; 4 - 55,2sC; 5 - 58,1sC; 6 - 60,1sC; 7 - 61,4sC.